Eusébio Sofrônio Jerônimo nasceu em Estridão (na atual Croácia) por volta de 347, mas só foi batizado entre 360 e 366, quando viajou para Roma, onde Jerônimo estudou com o gramático Hélio Donato.
Depois de muitos anos na capital imperial, Jerônimo viajou com Bonoso para a cidade de Augusta dos Tréveros, a atual Tréveris, na Alemanha. Aí, se dedicou aos estudos e travou amizade com muitos cristãos. Alguns deles o acompanharam quando ele partiu, por volta de 373, em viagem para Antioquia, onde ficou por algum tempo. Nessa cidade, dois de seus companheiros morreram e, ele próprio, ficou seriamente doente mais de uma vez. Durante uma destas enfermidades (perto do inverno de 373-374), Jerônimo teve uma visão que o levou a abandonar seus estudos seculares para dedicar-se completamente a Deus. Tomado por um desejo de viver em penitência, Jerônimo passou um tempo no deserto de Cálcis, no sudoeste de Antioquia, uma região conhecida como a “Tebaida Síria”, onde moravam numerosos monges eremitas. Durante este período ele se dedicou a aprender pela primeira vez o hebraico, sob a tutela de um judeu convertido e é possível que ele tenha mantido correspondência com os judeus-cristãos de Antioquia. Por volta desta época, Jerônimo começa a tradução de fragmentos da bíblia.
Após o longo período em Antioquia, São Jerônimo voltou para Roma, onde permaneceu por três anos (382-385) na corte do papa Dâmaso I e da liderança cristã da cidade. Recebeu diversos encargos em Roma e realizou uma revisão da Bíblia Latina (Vetus Latina) baseando-se em manuscritos gregos do Novo Testamento. Atualizou também o saltério, o livro que contém os Salmos, e que era na época utilizado em Roma, baseando-se na tradução grega da Septuaginta. Embora não tenha ficado claro para ele na ocasião, a tradução de muito do que depois se tornaria a Vulgata latina demoraria ainda muitos anos e se tornaria seu mais importante legado.
Em agosto de 385, Jerônimo saiu definitivamente de Roma e voltou para Antioquia com seu irmão Pauliniano, diversos amigos e algumas mulheres. O grupo, acompanhado do bispo Paulino de Antioquia, peregrinou por Jerusalém e os lugares santos da Palestina antes de seguir para o Egito, onde viviam os monges do deserto.
Após uma vida dedicada aos estudos e à produção de importantes obras para o cristianismo, em 30 de setembro no ano 420, São Jerônimo morreu perto de Belém. Diz-se que seus restos, originalmente enterrados em Belém, foram transferidos para a Basílica de Santa Maria Maior, em Roma, em Roma, embora outros locais no ocidente também reivindiquem a posse de alguma relíquia relacionada a esse santo.